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細胞凍存操作步驟操作步驟(一)細胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對數生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;4.離心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節(jié)凍存液中細胞的終密度為5×106/ml~1×107/ml;6.將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作...
2019 3-4
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PALL血清替代品供應商告訴你如何解凍血清從字面上我們不難看出PALL血清替代品是什么,PALL血清替代品就是一種代替血清的一款藥劑。那什么是血清呢?血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿,如何解凍血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。避免產生沉淀物1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-...
2019 2-20
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細胞適應干細胞無血清培養(yǎng)基的方法眾所皆知干細胞無血清培養(yǎng)基的基本配方:基本成分為基礎培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產的細胞在體外培養(yǎng)時,多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當其在無血清、無蛋白培養(yǎng)基中生長時,由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長。1.直接適應——細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉換到干細胞無血清培養(yǎng)基(SFM)中。一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應干細胞無血清培養(yǎng)基。對于直接適應,接種細胞密度應該:2.5×10~3.5×...
2019 1-16
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蛋白負染色試劑盒優(yōu)缺比一比優(yōu)缺比一比:1.蛋白負染色試劑盒缺點:需搭配黑底容器以便觀察優(yōu)點:(1)特殊原理:負染原理,染劑只染膠體,不結合蛋白(2)快速染色:染色過程只需5分鐘,不需要醋酸固定(3)高靈敏度:超高染色靈敏度(4)實驗相容:染色過后可進行蛋白質轉漬或、電泳溶離、質譜儀蛋白質鑒定與轉譯后修飾分析。(5)安全可靠:染液不具毒性且可室溫儲存(6)方便觀察:肉眼可見影像,不須熒光2.SYPRORuby優(yōu)點:靈敏度高缺點:(1)操作過程需要全程避光(2)須長時間過夜染色(3)操作過程需搭配有機溶劑...
2019 1-16
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低速離心機使用注意事項低速離心機使用注意事項1.低速離心機轉頭應固定在準確位置,固定螺絲應擰緊,轉頭等配件是否有裂縫及腐蝕,地線接觸情況。2.低速離心機必須使用獨立的插座,保證電壓穩(wěn)定;如用戶電壓不穩(wěn)定,必須連接穩(wěn)壓電源,以免損壞離心機;臺式低速離心機要放在結實、穩(wěn)固、水平的臺面上,機箱周圍留有一定空間,保持通風良好。3.低速離心機每次使用完后,應打開蓋子,擦去冷凝水,然后自然晾干;離心前后,轉頭必須輕輕垂直放下或提起,避免碰撞轉軸和轉頭。4.離心機轉頭,吊籃,套管等,使用完畢后,應擦干,并分別放...
2019 1-14
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你知道干細胞無血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點么?干細胞無血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊動物細胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數的無血清產品含有向細胞內轉運離子的轉鐵蛋白和調節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質如清蛋白,纖連蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反應器剪切力,提供細胞貼壁所需的基質,作為脂類和其他生長因子的載體等。在我們使用干細胞無血清培養(yǎng)基中也是分為優(yōu)缺點的,下面小編就給大家講一講吧干細胞無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點1.可避免血清批次間的質量...
2019 1-7
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細胞培養(yǎng)新技術——中空纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)細胞培養(yǎng)新技術——中空纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)為了讓細胞培養(yǎng)更簡單、更經濟、更,美國FiberCellSystems公司十余年來一直致力于中空纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的開發(fā)。如今,這種與眾不同的培養(yǎng)系統(tǒng)已經上市了。FiberCell中空纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)模擬了生物體循環(huán)系統(tǒng)中毛纖維的結構及功能,將天然親水聚合物,拉成兩端有開口的纖維。將此種中空纖維裝入柱狀的塑膠容器中,其成品就像光纖排列在電纜中一樣。它利用中空纖維膜隔離細胞與細胞培養(yǎng)基,在中空纖維的外壁培養(yǎng)細胞??绽w維是一種很小的、圓柱形的透...
2019 1-7
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新手培養(yǎng)細胞注意事項培養(yǎng)細胞是醫(yī)學研究生的基本功。細胞嬌貴,一不小心容易出問題。作為新手培養(yǎng)細胞要注意那些呢。1、不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會...
2019 1-4
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