GE Ficoll-Paque 淋巴細胞分離液是高分子量蔗糖聚合物和泛影酸鈉溶液。Ficoll-Paque密度梯度介質(zhì)利用簡單快速離心程序從少量或大量血液中有效提取高產(chǎn)和高純度的活單核細胞。Ficoll-Paque PLUS是無菌即用型產(chǎn)品，推薦用于單個核細胞的常規(guī)分離。

產(chǎn)品訂購信息

品牌 貨號 產(chǎn)品描述 包裝

GE 17-1440-02 Ficoll-Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液 6 × 100 ml

GE 17-1440-03 Ficoll-Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液 6 × 500 ml

GE 17-5442-02 Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml淋巴細胞分離液 6 × 100 ml

GE 17-5442-03 Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml淋巴細胞分離液 6 × 500 ml

GE 17-5446-52 Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 淋巴細胞分離液 6× 100 ml

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華雅干細胞-客服中心：4000212020

GE Ficoll-Paque 淋巴細胞分離液是高分子量蔗糖聚合物和泛影酸鈉溶液。Ficoll-Paque密度梯度介質(zhì)利用簡單快速離心程序從少量或大量血液中有效提取高產(chǎn)和高純度的活單核細胞。Ficoll-Paque PLUS是無菌即用型產(chǎn)品，推薦用于單個核細胞的常規(guī)分離。

主要特征

1. 經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制測試
2. 分離所得的細胞存活細胞率>90%
3. 低水平內(nèi)毒素
4. 質(zhì)量管理系統(tǒng)下生產(chǎn)，符合ISO 13485:2003標準（Ficoll-Paque PREMIUM）
5. 正確存儲條件下穩(wěn)定性至少保持3年

Ficoll-Paque淋巴細胞分離液產(chǎn)品分類

1. Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml單個核細胞分離液適用血液、骨髓和臍帶血來源的人單個核細胞分離制備，臨床研究和細胞治療生產(chǎn)級別。后續(xù)可以通過培養(yǎng)分離得到間充質(zhì)干細胞。
2. Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 單個核細胞分離液適用密度較低的人單個核細胞的富集，如間充質(zhì)干細胞和單核細胞，同樣應(yīng)用于臨床研究和細胞治療。
3. Ficoll-Paque PLUS 用于人外周血的單個核細胞分離，僅供科研使用。

GE Ficoll-Paque 獲得的單個核細胞（含淋巴細胞）懸液具有以下特點：

1. 分離所得的細胞中95 ± 5%為單個核細胞
2. 分離所得的細胞存活細胞率 > 90%
3. 可回收原始的血液樣本中60 ± 20%的單個核細胞
4. 3 ± 2%的粒細胞
5. 5 ± 2%的紅細胞
6.  

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Ficoll-Paque PLUS淋巴細胞分離液產(chǎn)品參數(shù)：

  物理狀態(tài)：無色液體

  密度：1.078 g/ml

  pH范圍：5.5-7.5

  內(nèi)毒素活性：< 0.12 EU/ml

  有效期：3年

  保存：4℃-30℃

  成分：Ficoll-Paque PLUS是一種無菌的、即用型的試劑，含有Ficoll PM400、泛影酸鈉和二鈉鈣EDTA。密度已經(jīng)被優(yōu)化，用于分離外周血的人淋巴細胞。

應(yīng)用

  人外周血、骨髓和臍帶血淋巴細胞分離

骨  髓、胎盤間充質(zhì)干細胞分離

 密度梯度離心原理

見圖，以人外周血為例，血液加入Ficoll-Paque密度梯度分離液后離心分層，從上到下分四層：

血漿層

單個核細胞層：淋巴細胞、單核細胞、血小板（骨髓和臍帶血等樣本還有間充質(zhì)干細胞）

Ficoll-Paque分離液層：密度1.077g/mL

紅細胞、粒細胞層

紅細胞和多形核粒細胞比重較大，為1.092左右，而淋巴細胞和單核細胞比重較小，為1.075～1.090。Ficoll-Paque密度1.077g/mL介于兩者之間，并且分離液中的Ficoll PM400是一種高聚糖，能促進紅細胞凝集。

操作步驟

使用前把Ficoll-Paque density gradient media加熱到18°C - 20°C。若樣本量超過3mL，換用直徑更大的離心管，以保證Ficoll-Paque 分離液：2.4 cm，血液樣本：3.0 cm的高度。

樣本制備

使用新鮮血液確保所分離的單個核細胞的活性。樣本也要加熱到18°C - 20°C。

1. 10mL離心管加入2mL抗凝血和等量的平衡鹽溶液。

2. 顛倒或吸管混勻血液和緩沖液。

單個核細胞分離步驟

1. Ficoll-Paque試劑瓶顛倒多次混勻。

注射器法吸取Ficoll-Paque分離液：

見圖，去掉聚丙烯蓋，插入注射器針頭。

吸管法吸取Ficoll-Paque分離液：

去掉聚丙烯蓋，拉起鋁環(huán)，拉開金屬密封，移除銀環(huán)。拿掉橡膠密封，無菌操作吸取需要的Ficoll-Paque分離液。

離心管加入3mLFicoll-Paque分離液。

稀釋過的血液樣本小心鋪到Ficoll-Paque分離液上面。

注意：鋪樣本時小心不要和Ficoll-Paque分離液混合。

離心400g，30-40min。18°C - 20°C。

用無菌吸管吸掉上層血漿和血小板，不要碰到單個核細胞層（圖4，圖5）。

無菌吸管轉(zhuǎn)移單個核細胞層到無菌離心管。

洗滌分離細胞

1. 預(yù)估轉(zhuǎn)移的單個核細胞的體積。加入至少3倍體積的平衡鹽溶液（約6mL）。

2. 用吸管輕柔重懸細胞。

3. 離心，400-500g，10-15min，18°C - 20°C。

注意：高速離心會加速單個核細胞的回復(fù)。但是，低速離心（60-100g）能去除血小板。

4. 去掉上清。

5. 6-8mL平衡鹽溶液重懸單個核細胞。

6. 離心，400-500g（或60-100g），10min，18°C - 20°C。

7. 去上清。

8. 使用下游所需液體重懸細胞沉淀。

附：平衡鹽溶液配制

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